扦插试验设计
扦插试验采用完全随机区组设计,3次重复,每个区组将对照和用GGR6浸蘸的插穗各插450条,3个区组总计扦插2 700条。
3 扦插条件
扦插的前一天在采穗圃内选择生长健壮、整齐一致、无病虫害的马尾松母株剪取半木质化枝条带回试验地,当天晚上用流水将剪取的枝条浸泡,扦插前截取半木质化枝条的上部作为插穗,截取长度为8~10 cm,粗度为0.5 cm,顶部带顶芽,下切口平剪,去除插穗基部针叶,然后将剪好的插穗先用35 ℃温水浸泡0.5 h,再用0.2%多菌灵溶液消毒,再用0.2 mg·kg-1的GGR6浸蘸0.5 h,以清水处理作对照(CK)。扦插基质为珍珠岩、林下黄土、针叶腐殖土的混合基质(体积比为4:3:3)。
4 插后管理
扦插后遮光率一直控制在70%左右(用遮荫网控制),温度控制在20~30 ℃,相对湿度控制在80%~90%,按照需要进行喷雾处理,各区组条件相同,并进行常规管理。
5 取样及样品处理
扦插后每隔10天采样1次,每个测定指标均在3个区组各随机取5株,进行3次重复测定。采样后洗净吸干,先观察其生根情况,然后取插穗基部3 cm的皮层分别测定其多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)和吲哚乙酸氧化酶(IAAO)活性、黄酮类物质含量等。营养物质的测定是将随机取出的插穗在110 ℃烘箱中迅速杀青,再于70 ℃下烘至恒量,经粉碎过筛后,测定可溶性糖含量和